Sentrifugiputki on yksinkertainen putki, joka kestää suurta pyörimisnopeutta ja painetta, kuten joidenkin näytteiden erottaminen ja supernatanttisedimenttien erottaminen.Ultrasuodatussentrifugiputkessa on kaksi sisäputken ja ulkoputken kaltaista osaa.Sisäputki on kalvo, jolla on tietty molekyylipaino.Suurinopeuksisen sentrifugoinnin aikana pienemmän molekyylipainon omaavat vuotavat alempaan putkeen (eli ulompaan putkeen) ja suuremman molekyylipainon omaavat jäävät loukkuun ylempään putkeen (eli sisäputkeen).Tämä on ultrasuodatuksen periaate, ja sitä käytetään usein näytteiden tiivistämiseen.
Ultrasuodatussentrifugiputkia voidaan yleensä käyttää ilman esikäsittelyä, mutta proteiininäytteiden käsittelyssä, erityisesti laimeiden proteiiniliuosten (< 10 ug/ml), pitoisuuden talteenottonopeus ultrasuodatuskalvoilla ei useinkaan ole kvantitatiivinen.Vaikka PES-materiaalit minimoivat epäspesifisen adsorption, joissakin proteiineissa, varsinkin kun ne ovat laimeita, voi olla ongelmia.Epäspesifisen sitoutumisen aste vaihtelee yksittäisten proteiinien rakenteen mukaan.Varautuneita tai hydrofobisia domeeneja sisältävät proteiinit sitoutuvat todennäköisemmin irreversiibelisti eri pintoihin.Passivointiesikäsittely ultrasuodatussentrifugiputken pinnalla voi vähentää proteiinin adsorption menetystä kalvon pinnalla.Useimmissa tapauksissa kolonnin esikäsittely ennen laimean proteiiniliuoksen väkevöintiä voi parantaa talteenottonopeutta, koska liuos voi täyttää kalvolla ja pinnalla paljastuneet tyhjät proteiinin adsorptiokohdat.Passivointimenetelmänä on esiliottaa kolonni suuremmalla tilavuudella passivointiliuosta yli 1 tunnin ajan, pestään kolonni perusteellisesti tislatulla vedellä ja sentrifugoidaan sitten kerran tislatulla vedellä kalvolle mahdollisesti jäävän passivointiliuoksen poistamiseksi kokonaan. .Varo, ettet anna kalvon kuivua passivoimisen jälkeen.Jos haluat käyttää sitä myöhemmin, sinun on lisättävä steriiliä tislattua vettä, jotta kalvo pysyy kosteana.
Ultrasuodatussentrifugiputkia ei yleensä voida steriloida ja käyttää uudelleen.Koska yhden putken hinta ei ole halpa, monet yrittävät käyttää sitä uudelleen – kokemus on puhdistaa kalvopinta tislatulla vedellä monta kertaa ja sentrifugoida kerran tai kaksi.Pieni putki, joka voidaan sentrifugoida taaksepäin, voidaan upottaa tislattuun veteen ja sitten sentrifugoida taaksepäin useita kertoja, mikä on parempi.Sitä voidaan käyttää samalle näytteelle toistuvasti, ja se voidaan liottaa tislattuun veteen, kun sitä ei käytetä, mutta bakteerikontaminaatio on estettävä.Älä sekoita eri näytteitä.Jotkut sanovat, että liottaminen 20 % alkoholissa ja 1n NaOH:ssa (natriumhydroksidi) voi estää bakteerien kasvun ja kuivumisen.Niin kauan kuin ultrasuodatuskalvo tunkeutuu veteen, sen ei saa antaa kuivua.Toiset sanovat kuitenkin, että se tuhoaa kalvorakenteen.Joka tapauksessa valmistajat eivät yleensä tue uudelleenkäyttöä.Toistuva käyttö tukkii suodatinkalvon huokoskoon ja jopa aiheuttaa nestevuotoja, mikä vaikuttaa koetuloksiin.
Postitusaika: 05.09.2022